实验方法

同一个指标,
方法不同,结果口径也可能不同。

查看标准或文献方法时,应先核对指标定义、适用基质、前处理、校准范围和结果单位。只对照仪器名称,不能判断两组数据是否可比。

用于多类科研样品分析的色谱实验室
方法核对

判断一套方法能不能用于当前样品,先看五项。

操作步骤相似,不代表适用范围和结果含义相同。尤其要检查样品基质、目标物形态、定量范围和换算基准。

  1. 01

    测定对象

    确认测的是总量、提取态、游离态还是特定化合物,以及检测信号与目标物之间的对应关系。

  2. 02

    适用范围

    核对样品基质、目标物浓度范围、干扰物,以及方法用于定性、半定量还是定量。

  3. 03

    前处理与参数

    记录称样量、料液比、提取或消解条件、净化与衍生步骤,仪器参数按实际设备确认。

  4. 04

    校准与质控

    检查空白、标准曲线、平行样、加标回收、质控样或内标是否适合当前批次。

  5. 05

    计算与报告

    确认稀释倍数、含水率校正、鲜重或干重基准、结果单位,以及检出限和定量限。

常用技术路线

方法类别只说明技术路线,具体参数仍需逐项确认。

下面列出常见方法容易受影响的环节。选择项目时,应同时查看检测专题中的样品量、样品状态和方法说明。

提取净化

提取与净化

溶剂种类、pH、料液比和提取次数会影响回收率;固相萃取或柱分离还需检查上样量、洗脱条件和基质残留。

光度分析

比色与分光光度法

需设置试剂空白和样品本底,并控制显色时间、温度和测定波长。样品浑浊、颜色及共存物可能造成吸光干扰。

生化分析

酶活与免疫分析

采样后应控制保存时间和温度,避免反复冻融。酶活结果还需明确反应时间、蛋白或质量归一化方式及活性单位。

使用方法前

照着标准或文献操作前,逐项核对。

  • 指标定义和结果单位是否与项目一致
  • 方法是否验证过当前样品基质
  • 称样量、提取比例和稀释倍数是否完整
  • 标准曲线是否覆盖样品实际浓度
  • 空白、平行、回收率等质控是否齐全
  • 不同批次是否使用相同前处理和计算口径