水质微生物检测
水样菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、弧菌、真菌和其他指定微生物的培养、计数与鉴定方法。
水质微生物结果对采样瓶、余氯中和、运输温度和到样时间很敏感。培养法得到的是规定培养条件下可生长的微生物数量，PCR 或测序检测的是核酸信号，两类结果不能直接互换，也不能仅凭核酸阳性判断微生物是否存活。可检测菌落总数、大肠菌群、指定致病菌及水生微生物；饮用水项目按 GB 5749-2022及相应检测方法确认，养殖水和废水应采用各自适用的指标与判定依据。
生活饮用水二次供水游泳池水水产养殖水污水处理厂出水医院废水地表水/河流
检测 微生物检测项目
| 序号 | 检测指标 | 检测方法/依据 | GB 5749 限值（饮用水） | 询价 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 菌落总数（CFU/mL） | GB/T 5750.12-2006 平板计数法（36°C ± 1°C，48h） | ≤ 100 CFU/mL |  |
| 2 | 总大肠菌群（MPN/100mL） | 多管发酵法（MPN）/ 滤膜法 | 不得检出 | |
| 3 | 耐热大肠菌群（粪大肠菌群） | 多管发酵法（44.5°C ± 0.5°C） | 不得检出 | |
| 4 | 大肠埃希氏菌（E. coli） | GB/T 5750.12-2006 酶底物法（Colilert） | 不得检出 | |
| 5 | 贾第鞭毛虫 / 隐孢子虫 | 免疫荧光法 / 滤膜富集镜检 | < 1 个/10 L | |
| 6 | 弧菌（副溶血性弧菌） | TCBS 选择培养基 + 生化鉴定 | 水产养殖水参照 | |
| 7 | 真菌总数 | PDA 培养基，25°C 培养 5d | 参考 GB 5749 | |
| 8 | 异养细菌总数（HPC） | R2A 培养基，22°C，7d 培养法 | 管网生物稳定性指标 | |
| 9 | 军团菌 | BCYE 选择培养基培养 + PCR 确认 | 冷却塔水 / 中央空调 | |
| 10 | 沙门氏菌 / 志贺氏菌 | 增菌培养 + 选择培养基 + 血清型鉴定 | 污水/再生水评价 |
质量 采样与质量控制
使用无菌采样瓶，含氯水样按方法加入硫代硫酸钠中和余氯。采样时避免接触瓶口和瓶盖内侧，并记录采样点状态。
样品按要求在 4°C 左右运输，普通细菌指标尽量在 6 小时内送达。实验室记录到样温度和时间，超时样品需在报告中说明。
按方法设置阴性、阳性或培养基适用性对照，用于检查污染、培养条件和鉴定反应是否正常。
菌落总数和大肠菌群通常需要约 48 小时；致病菌、真菌和原虫因增菌、培养或镜检步骤不同，预计 5-7 个工作日。
分离菌株可结合 16S rRNA 测序或特异性 PCR 辅助鉴定；除非采用规定方法，核酸检测不能替代培养计数。
饮用水项目按 GB 5749-2022 的指标和相应方法安排。用于卫生许可或年检时，应同时核对采样要求和检测资质范围。
应用 应用场景
水厂出水、管网末梢和二次供水分别采样，菌落总数和大肠菌群等结果按 GB 5749-2022 对应指标比较。
可监测弧菌或异养细菌数量的时间变化；培养结果不能单独预测疾病，还需结合动物状态和水质参数。
进水、消毒前和出水按相同时间窗口采样，可比较大肠菌群等指标变化，同时记录消毒剂投加和余量。
采样时记录点位、时段、水温和余氯，并按适用标准选择菌落总数、大肠菌群或军团菌等项目。
按 GB 18466 及委托要求确定采样点和微生物项目，处理前后样品应分开使用无菌容器采集。
16S rRNA 测序提供群落相对组成，qPCR 可测指定基因拷贝数；两者与培养法 CFU 结果含义不同。
采样注意事项
① 使用灭菌玻璃瓶或专用无菌采样袋，含氯水样需加硫代硫酸钠（Na₂S₂O₃，0.1 mL/100 mL）；② 采样量：常规指标 500 mL，原虫（隐孢子虫/贾第虫）需 10 L；③ 样品采集后在 4°C 冷藏条件下运输，普通细菌指标需在 6 小时内送达，不超过 24 小时；④ 采样时应记录水温、余氯、pH 等现场指标；⑤ 不可冷冻（会导致细菌死亡，影响计数结果）。