酶活检测与试剂盒项目

酶活检测适用于土壤、植物和动物样品。植物和动物组织应统一采样部位与时间，采后快速冷冻并避免反复冻融；土壤样品需去除明显根系和石块、混匀，短期低温保存，具体时限按对应货号说明书确认。常量法和微量法的加样体积、光程和计算式不同；结果可按 U/g 鲜重、U/mg 蛋白或 U/g 土壤等口径表示，必须连同提取条件和归一化方式一起比较。试剂盒测得的是规定反应条件下的体外酶活，不直接等同于样品中的代谢通量。

试剂盒类别

项目选择示例

1、土壤处理与酶活比较

应用	指标
有机质水平或添加处理	α－葡糖苷酶、β－木糖苷酶、磷酸酶
添加有机物（秸秆还田）	β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、脲酶、磷酸酶
化肥施用	几丁质酶、磷酸酶、过氧化物酶、脲酶
恢复措施前后	过氧化氢酶、脱氢酶、多酚氧化酶、脲酶、土壤β-葡萄糖苷酶、磷酸酶
不同耕作制度	酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、α－葡糖苷酶、脲酶

2、碳、氮、磷转化相关项目

应用	指标
凋落物添加或分解阶段	糖酶
有机磷处理或磷有效性比较	酸性、碱性磷酸酶活性
碳源添加与蔗糖转化相关比较	蔗糖酶
有机质处理前后	过氧化氢酶
纤维素底物分解相关比较	纤维素酶
不同氮、磷、钾施用量比较	脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶、磷酸酶
有机质或纤维素添加处理	纤维素酶
凋落物添加与氮转化相关比较	脲酶、蛋白酶、氨肽酶
微生物氧化还原活性相关比较	脱氢酶

3、污染物处理前后比较

应用	指标
农药	酸性磷酸酶、β－葡糖苷酶、脱氢酶、过氧化氢酶、纤维素酶、磷酸酶
微塑料	过氧化氢酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、脲酶、磷酸酶
重金属	脱氢酶、碱性磷酸酶、β－葡糖苷酶、蛋白酶活性、脲酶、过氧化氢酶、磷酸酶、蔗糖酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶
酸雨	脱氢酶、蛋白酶、磷酸酶

方法开发与批次检查

方法依据	记录反应原理、适用样品、提取液、读数波长、计算式和参考文献。选择货号时还需根据样品类型与预期活性范围确认适用性。
条件确认	对提取比例、底物浓度、反应温度、反应时间和线性范围进行记录。不同基质不默认共用同一提取条件。
作业记录	按批次记录试剂配制、分装、标识、储存条件和操作人员；配方或步骤变更时同步更新说明书版本。
批次抽检	设置试剂空白、标准或参考样品和重复孔，记录各项接受范围与偏差处理。批次检查结果应与对应货号关联。
稳定性检查	在规定储存时间点检查空白、标准曲线或参考样品响应。未开封、开封后和反复冻融的稳定性需分开评价，有效期以货号标签为准。

使用与结果计算

1、不同货号采用的显色反应、读数波长和反应时间可能不同，吸光度应落在说明书给出的线性范围内。

2、使用前核对试剂盒组分、配制步骤和储存条件。比色皿或酶标板、离心机、匀浆设备和移液器等耗材与仪器需按方法另行准备。

3、样品质量、提取液体积、稀释倍数和反应时间须准确记录，并按说明书设置试剂空白、样品对照或标准曲线。

4、结果按标准曲线或摩尔吸光系数计算，并注明活性定义、单位和归一化方式。未经一致性验证时，常量法与微量法结果不直接合并。